22 мая 1939 года из ворот пражского завода ЧКД выехали первые девять серийных танков LT vz.38, переименованных по германской классификации в PzKpfw. 38 (t). Ни один танк LT vz.38 не успел поступить в чехословацкую армию до захвата Германией Чехии и Моравии.
Впервые PzKpfw. 38 (t) использовались в бою во время польской кампании 1939 года. Эти танки воевали также во Франции в 1940 г. и на Балканах в 1941 г. По плану «Барбаросса» немцы выставили против Советского Союза 664 танка этого типа, которые составляли основу 7-й, 8-й, 12-й, 19-й и 20-й танковых дивизий вермахта. Во время войны эти танки экспортировались в Венгрию, Словакию, Румынию и Болгарию.
Всего было выпущено 1414 танков PzKpfw. 38 (t) - LT vz.38, последней модификацией которых стал PzKpfw. 38 (t) Ausf.G. Кроме того на их шасси выпускались артиллерийские самоходные установки «Grille» и противотанковые «Marder III». В мае 1942 г. их производство было прекращено.